白三烯ELISA檢測試劑盒是一種基于酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)的高靈敏度定量檢測工具，專門用于測定生物樣本中白三烯(Leukotrienes,LTs)的濃度，包括LTB4、LTC4、LTD4、LTE4等關(guān)鍵亞型，廣泛應(yīng)用于炎癥疾病研究、藥物開發(fā)及臨床診斷等領(lǐng)域。其核心原理是通過抗原-抗體特異性結(jié)合與酶催化顯色反應(yīng)，實現(xiàn)目標(biāo)分子的精準(zhǔn)定量。
白三烯ELISA檢測試劑盒的操作流程：
1、試劑與樣本準(zhǔn)備：
試劑盒提前從2~8℃取出，置于室溫(20~25℃)平衡15~30分鐘。
濃縮洗滌液若有結(jié)晶，可40℃水浴助溶后再按比例(如20倍/30倍)稀釋成工作液。
標(biāo)準(zhǔn)品按說明書逐級稀釋(如0、15、30、60、120、240 pg/mL等濃度梯度);樣本若需稀釋(如5倍)，按相應(yīng)比例用樣本稀釋液混勻。
樣本(血清、血漿、上清等)避免反復(fù)凍融，且不能含有疊氮鈉(NaN?)，因其會抑制HRP活性。
2、加樣：
取所需酶標(biāo)板條，設(shè)空白孔(僅加稀釋液或空白)、標(biāo)準(zhǔn)品孔(各濃度50μL)、待測樣本孔(先加稀釋液40μL + 樣本10μL，或直接加100μL，依說明書)。
加樣時將 tip 靠于孔底，避免產(chǎn)生氣泡，輕輕混勻(勿觸及孔壁)。
第一抗體/酶結(jié)合物孵育：
除空白孔外，每孔加酶標(biāo)試劑(HRP標(biāo)記的檢測抗體，通常100μL)，封板膜封好。
37℃恒溫箱或水浴孵育30~60分鐘(具體時間見說明書)。
3、洗滌：
揭掉封膜，棄液體，甩干。每孔加滿洗滌液(約300~350μL)，靜置1分鐘，甩干，在吸水紙上拍干。
重復(fù)洗滌3~5次(手工或洗板機(jī))。
4、顯色：
每孔依次加顯色劑A 50μL、顯色劑B 50μL，輕輕振蕩混勻。
37℃避光顯色10~15分鐘(肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)孔呈藍(lán)色梯度)。
5、終止與讀數(shù)：
每孔加終止液50μL(藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)，15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm波長(有時加630nm參比)測定各孔OD值。
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，代入樣本OD值算出濃度，再乘以稀釋倍數(shù)即為實際濃度。
021-57763112
86-021-57690166
