訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：人博卡病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P97211
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
上皮細(xì)胞總RNAHMEpiC NA聚酰胺粉(柱層析用，10-30目)Polyamide柱層析用，10-30目

CTSL1 Others Mouse 小鼠 CTSL / Cathepsin-L 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸氫二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydratefor HPLC, ≥99%(T)

HCT-15 結(jié)腸癌細(xì)胞(農(nóng)殘級) sulfate anhydrous農(nóng)殘級

CL-0401NCI-H446(小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrousfor HPLC,≥99.0%(T)

MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞(for HPLC,≥99.0%) bicarbonatefor HPLC,≥99.0%
DPYS Others Human  DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 抑氨肽酶(進(jìn)口)>99%,美國進(jìn)口sc-202975Bestatin,Ubenimex

軟骨細(xì)胞HC-a高藜蘆酸()HPLC≥98.0%(3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid

羅猴胎腎細(xì)胞;MA104 腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞，C6細(xì)胞 NCI-H446 [H446](小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)二乙酰一1(>98%，BR)>98%，BRDiacetyl monoxime

前列腺癌細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145]馬來酸二乙酯(>98%，BR)>98%，BRDiethyl maleate

TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二氫細(xì)胞弛素(>98%，BR)>98%，BRDihydrocytochalasin B
人博卡病毒核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22草酸脫氫美國進(jìn)口Dehydro Amlodipine Oxalate

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr 腹水瘤細(xì)胞，S-180細(xì)胞 SVEC4-10細(xì)胞，小鼠結(jié)血管上皮樣細(xì)胞(R)-美國進(jìn)口(R)-Amlodipine

永生化表皮細(xì)胞;HaCaT阿瑞匹坦-標(biāo)記d4美國進(jìn)口Aprepitant - Labeled d4

CTLA4 Others Mouse 小鼠 CTLA4 / CD152 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿瑞匹坦-M3代謝物美國進(jìn)口Aprepitant-M3 Metabolite

猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1OSI-420，游離堿（去甲埃羅替尼）美國進(jìn)口OSI-420, Free Base (Desmethyl Erlotinib)
檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。