訂購信息：
 產(chǎn)品名稱：柯薩奇病毒A10型核酸檢測試劑盒
規(guī)格：50T
編號：BH-P96390
分類：熒光PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

準(zhǔn)備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份
使用及效果：
產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

檢測步驟：
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A京尼平甙()GeniposideHPLC≥98%,

MICB Others Human  MICB 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 京尼平甙Geniposide>98%,BR

絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HCMSC甲; 甲基素17-Methyltestosterone>98%,BR

FLRT2 Others Human  FLRT2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四氫生物蝶呤游離堿Tetrahydro-L-Biopterin free base>99%

HK-2 腎近曲小管上皮細(xì)胞鹽酸替羅非班Tirofiban HCl>99%,一水物，BR
CXCL14 Protein Human 重組 CXCL14 / BRAK 蛋白蛇床子素（）HPLC≥98%，Osthole

MRC-5(胚肺成纖維細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蛇床子素≥98%,BROsthole

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK麝香酮（）GC≥98%，Muscone

心肌細(xì)胞 (HCMa) (1×106 )升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷（）HPLC≥98%，Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside

T-110A透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液)1mL山梨酸鉀（）含量測定Potassium Sorbate
柯薩奇病毒A10型核酸檢測試劑盒顱骨造骨細(xì)胞裂解物HCOL衣霉素，英文名或英文縮寫：Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus，級別：組織培養(yǎng)級,γ-射線滅菌,10mg/ml，規(guī)格：100克

IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-(4-安本基)醇 1-(4-cMINOPHqNYL)qTHcNOL 1427-89-2

小鼠瘤細(xì)胞;EL4孔雀石綠;中國綠;本安綠;減性孔雀石綠;品綠;鹽基塊cchitqoxclctq 269-64-

LX-2細(xì)胞，肝星形細(xì)胞正常 胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞,HFSF細(xì)胞 家貓肺細(xì)胞;FCA-L2馬來酸二，英文名或英文縮寫：Dimetxyl ，級別：BR，95%，規(guī)格：500克

LoVo(大腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23105-95-1L-派啶-2-羧酸L(-)-Pipecolinic acid